一、甘南藏族自治州羊泰勒虫病流行病学调查(论文文献综述)
徐雪雪,王春玲,马明阳,陈思锦,田万年[1](2020)在《吉林市左家镇羊泰勒虫感染情况调查》文中研究表明为了解吉林市左家镇羊泰勒虫感染情况,对采自左家镇4个村的278份绵羊血液样品进行血液涂片染色检查、羊泰勒虫PCR检测及测序、感染率统计。结果:检测到的羊泰勒虫经核苷酸测序鉴定为吕氏泰勒虫(同源性为99.9%),平均感染率为19.06%(53/278);未发现尤氏泰勒虫、绵羊泰勒虫感染。结论:吉林市左家镇饲养羊存在吕氏泰勒虫感染,应加强羊泰勒虫病的防治工作。
宁东坡,张杨,肖培培,李敏,樊新丽,巴音查汗[2](2020)在《新疆博州部分地方羊泰勒虫病流行病学调查》文中进行了进一步梳理试验对博州市7个试验点的羊只血样(N=1 520)及羊体表的蜱虫(N=1 088),经18S rRNA进行PCR检测及序列比对等方法进行了羊泰勒虫感染情况调查。结果显示:血液源性和蜱源性羊泰勒虫的感染率分别为21.64%(329/1 520)和3.68%(40/1 088);经序列比对分析结果与预期片段相符,说明二者感染均为绵羊泰勒虫;放牧羊(26.81%,233/869)的感染率高于舍饲羊(14.75%,96/651);此次对采集的绵羊血液及体表蜱虫检测未发现吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫。试验结果表明:绵羊泰勒虫在新疆博州的部分地区存在不同程度的感染,可补充羊泰勒虫病的区域性流行病学数据,以期为后续该病的综合防控提供参考依据。
郝桂英,袁晓琴,陈永航,莫全,严光文,李凤琴,杨应东,万洁,文建国,吉色曲伍[3](2020)在《四川省攀西地区山羊泰勒虫病血清学检测》文中研究说明为了解四川省攀西地区山羊泰勒虫病流行情况,用双抗原夹心ELISA方法,对采自凉山彝族自治州和攀枝花市10个县/市的640份山羊血清样品进行检测。结果显示:攀西地区10个县/市羊泰勒虫血清抗体阳性率介于52.78%~100%,平均阳性率为73.44%(470/640);春季阳性率最高,秋季最低;经卡方检验,不同地区和季节的羊泰勒虫血清抗体阳性率差异均显着(χ2=54.392,P <0.01和χ2=38.157,P <0.01)。结果表明,攀西地区羊泰勒虫病流行较为严重,且流行呈现明显的地区和季节性特征。本研究为该地区羊泰勒虫病防控提供了流行病学参考数据。
田万年,宋旗,孙凰员,郑秀红[4](2020)在《羊泰勒虫套式PCR检测方法的建立》文中进行了进一步梳理为了建立一种特异、敏感、快速检测羊泰勒虫方法,以羊泰勒虫主要表面蛋白(MPSP)基因设计引物,建立羊泰勒虫套式PCR检测方法。结果表明,该方法只能扩增出羊泰勒虫,而对照组羊巴贝斯虫、羊无浆体和弓形虫基因组DNA均未扩出目的条带。该方法敏感性是普通PCR的1 000倍,其最低检测到1拷贝数的MPSP基因。对采自吉林珲春地区30份羊血液样本检测发现,套式PCR阳性率为46.6%(14/30),高于普通PCR(40.00%,12/30)和血液涂片染色(23.33%,7/30),三者阳性符合率为100%。结果表明,所建立的套式PCR可用于羊泰勒虫病的诊断和流行病学调查。
田万年,徐雪雪,张佳娟[5](2020)在《羊泰勒虫吉林株的鉴定及系统进化分析》文中研究说明为了解吉林省延边地区流行的羊泰勒虫种类,采用血涂片镜检和PCR方法对羊泰勒虫进行鉴定和遗传学分析。血涂片镜检观察发现,血涂片红细胞中存在圆形虫体。对羊泰勒虫MPSP基因生物信息学分析显示,MPSP编码的蛋白包含3个N-糖基化位点,14个潜在抗原表位,含有信号肽结构。建立系统进化树显示,分离到的3个虫株与Theileria luwenshunli(GQ281044)同源性为100%,亲缘关系较近,分离的羊泰勒虫为吕氏泰勒虫。由该试验结果可以得出,吉林省延边地区流行的羊泰勒虫为吕氏泰勒虫。
韩蓉[6](2018)在《青海省硬蜱多样性及蜱传病原基因多态性研究》文中研究说明青海省是我国顶层战略部署“一带一路”和“三江源生态保护”项目中的重点区域,随着经济带和保护区的发展,人员物资的流动,蜱及蜱媒病严重威胁着人和动物的健康,研究该地区蜱种及蜱携带病原的多样性和病原基因的多态性,评估蜱传病原对生态环境和公共卫生安全影响的风险因素,为青海省及周边国家制定防控策略提供数据支撑,对深入了解我国蜱种及蜱传疫病有着深远的意义。本研究在青海省选取22个县市作为采样点,采用布旗法和人工诱捕法共采集1104只自然界游离的饥饿成蜱;通过传统形态学鉴定并结合16S rRNA、COI和ITS2基因的分子学鉴定得出有3属7种蜱,分别为青海血蜱(454/1104)、丹氏血蜱(42/1104)、西藏血蜱(2/1104)、阿坝革蜱(263/1104)、草原革蜱(246/1104)、森林革蜱(94/1104)和草原硬蜱(3/1104)。采用PCR和RLB技术对鉴定的蜱种进行无浆体(羊无浆体、边缘无浆体、牛无浆体、嗜吞噬细胞无浆体)、立克次体、伯氏疏螺旋体、梨形虫和蜱传新发病原(山羊无浆体、Colpodella spp.病原)的分子检测。PCR检测结果显示:羊无浆体的感染率为5.6%、牛无浆体为11.1%、嗜吞噬细胞无浆体为3.1%、立克次体为44.7%、伯氏疏螺旋体为5.6%、梨形虫病为22.9%、山羊无浆体为4.5%、Colpodella spp.病原为1.6%,没有检测到边缘无浆体病原。阳性样品进一步利用基因测序进行蜱传病原的种类确定,获得4种羊无浆体的MSP4基因序列;5种牛无浆体的16S rRNA基因序列;3种嗜吞噬细胞无浆体的16S rRNA基因序列;6种不同的立克次体gltA和ompA基因序列(Rickettsia sibirica subsp.sibirica BJ-90、R.raoultii、Candidatus rickettsia tibetani、Candidatus rickettsia gannanii Y27菌株和F107菌株、Rickettsia sp.10CYF);2种伯氏疏螺旋体的fla基因序列(Borrelia burgdorferi s.s、B.garinii);3种巴贝斯虫(Babesia motasi-like、B.canis、B.caballi)和5种泰勒虫(Theileria sinensis、T.uilenbergi、T.luwenshuni、T.ovis、T.annulata)的18S rRNA基因序列;2种山羊无浆体的gltA、16S rRNA和groEL基因序列;3种Colpodella spp.病原的18S rRNA基因序列。RLB方法检测结果显示:在青海地区检测到4种伯氏疏螺旋体(B.burgdorferi、B.garinii、B.afzelii、B.valaisiana)及4种混合感染类型(“B.burgdorferi+B.garinii”、“B.garinii+B.valaisiana”、“B.burgdorferi+B.garinii+B.afzelii”、“B.burgdorferi+B.garinii+B.afzelii+B.valaisiana”)。检测到6种梨形虫(B.matasi-likeLT/TZ、T.annulata、T.uilenbergi、T.luwenshuni、T.ovis、T.sinensi)及3种混合感染类型(B.matasi-like+T.luwenshuni、T.uilenbergi+T.annulata、T.uilenbergi+T.luwenshuni)。利用生物信息学软件对检测病原获得的数据进行疫病风险评估,分析得出影响疫病高发的风险因素。对青海省分布的羊无浆体MSP1a基因重复序列多态性分析,在采集的蜱体内获得34条MSP1a基因的核酸序列,鉴定出20条不同的MSP1a基因N’端的氨基酸重复类型,分析得出18种含有不同的氨基酸重复类型组合的羊无浆体菌株型。在全国12个省份24个地区采集的552份羊DNA样品中,获得44条MSP1a基因的核酸序列,鉴定出24条不同的MSP1a基因N’端的氨基酸重复类型,分析得出19种含有不同的氨基酸重复类型组合的羊无浆体菌株型。
陈银银[7](2018)在《基于rMPSP的牛泰勒虫病试纸条快速诊断方法的建立》文中指出牛泰勒虫病是由泰勒属的泰勒虫寄生于牛的红细胞和网状内皮细胞所引起的血液原虫病,病牛表现为发热、贫血、黄疸及体表淋巴结肿大,严重的引起死亡。在牛泰勒虫病的病原中,小泰勒虫和环形泰勒虫是致病性最强、危害最为严重的两种病原。由小泰勒虫引起的牛泰勒虫病又称为东海岸热,主要分布于非洲,目前我国并未发现有小泰勒虫感染。环形泰勒虫、瑟氏泰勒虫和中华泰勒虫是我国已报道的牛泰勒虫病病原。本实验室的前期工作发现,主要梨形虫表面蛋白MPSP能够与三种泰勒虫的阳性血清发生强烈反应,可以作为同时检测牛泰勒虫病的通用抗原,本研究在此研究的基础上,表达了中华泰勒虫MPSP蛋白,并制备了相应的兔源性多克隆抗体,建立了牛泰勒虫病试纸条快速诊断技术。主要研究内容如下:根据已发表的序列设计合成引物,PCR扩增得到了中华泰勒虫MPSP基因,构建pET-28a(+)重组质粒,转入大肠杆菌表达系统中诱导表达,并纯化该重组蛋白,对其反应原性进行分析。Western-Blot分析结果表明,MPSP蛋白能够与环形泰勒虫、瑟氏泰勒虫、中华泰勒虫等3种牛泰勒虫阳性血清反应,但与牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫及大巴贝斯虫阳性血清及无梨形虫感染的牛阴性血清无交叉反应,说明该蛋白种属特异性较好,可作为泰勒虫属疾病的诊断抗原。用MPSP蛋白分三次(0 d,14 d和28 d),每次以100μg/只的剂量免疫三只健康的新西兰大白兔(免疫前采集阴性血清),三免10天后进行心脏取血,采用酶联免疫吸附试验测定血清抗体的效价,得到的三只家兔的血清抗体效价分别为1∶25600、1∶12800、1∶12800。采用Protein A法从血清中纯化抗体并对其进行SDS-PAGE电泳分析,经考马斯亮蓝染色后可以清晰的看到轻链与重链两条带。利用纯化的蛋白及相应抗体制备了牛泰勒虫病的免疫胶体金试纸条快速诊断技术。试纸条的硝酸纤维素膜上分别以抗原和多克隆抗体作为检测线和质控线;以胶体金标记的MPSP蛋白金标抗原,并喷涂于玻璃纤维纸上成为胶体金垫。将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜、吸水垫组装于PVC板上,切成2.5 mm的条状,制成胶体金试纸条成品。制成的该试纸条特异性良好,操作简便快捷,20 min即可完成样品检测。通过性能评价,结果显示,该方法可检出牛感染泰勒虫后第3周至第15周针对MPSP的抗体,表明该试纸条可以用于牛泰勒虫病的诊断。采用所建立的rMPSP牛泰勒虫免疫胶体金试纸条对采自甘南藏族自治州的80份血清样品进行了诊断,并与本实验室已经建立的rMPSP-ELISA方法进行比较。结果显示,免疫胶体金试纸条和rMPSP-ELISA检测的阳性率分别为65%和72.5%,且两种方法的强阳性符合率和阴性符合率均为100%,弱阳性符合率为83.3%,表明该胶体金试纸条具有较好的特异性,敏感性较ELISA方法略差,但免疫胶体金试纸条具有操作简便、速度快、结果可观、适用于野外现场诊断等优点,故可以作为一种牛泰勒虫病的新型诊断工具。综上所述,本研究建立了基于rMPSP的牛泰勒虫病的免疫胶体金试纸条诊断技术,为牛泰勒虫病的流行病学调查提供了一种新的检测方法。
陈银银,赵帅阳,关贵全,李有全,刘爱红,石红梅,殷宏,刘军龙,罗建勋[8](2018)在《甘南藏族自治州部分地区牦牛泰勒虫病的血清学调查》文中研究指明为了解甘肃省甘南藏族自治州牦牛泰勒虫的感染状况,采用可同时检测3种牛泰勒虫感染的重组MPSP蛋白间接ELISA方法,对采自甘南藏族自治州合作市、夏河县、碌曲县和玛曲县的320份牦牛血清样品进行了检测。结果显示,血清抗体阳性率为71.56%(229/320),表明该地区牛泰勒虫感染严重。SPSS22.0.0.0软件卡方检验分析结果表明,甘南藏族自治州这4个县(市)之间牦牛血清抗体阳性率无显着性差异(P=0.11,x2=2.39,df=3),不同年龄段及不同性别牦牛之间阳性率也无显着性差异(P=0.09,x2=2.13,df=2;P=0.07,x2=0.02,df=1)。本研究为该地区牦牛泰勒虫病的防控工作提供了流行病学参考数据。
田万年,薛书江,贾立军,张守发,李国江[9](2017)在《吉林省部分地区羊泰勒虫病流行病学调查及分类鉴定》文中进行了进一步梳理为了解吉林省部分地区羊泰勒虫病的流行情况,试验采用PCR方法对采自吉林省部分地区羊血液样本235份进行羊泰勒虫检测,并对部分阳性样本进行测序分析,建立系统发育树。结果显示,羊泰勒虫阳性率为28.08%,为吕氏泰勒虫单独感染,没有检测到尤氏泰勒虫和绵羊泰勒虫感染。系统发育树分析表明,吉林省吕氏泰勒虫与青海分离株分布于同一分支,亲缘关系最近,与绵羊泰勒虫、尤氏泰勒虫亲缘关系较远。此次调查为吉林省羊泰勒虫病的综合防治提供了理论依据。
王海国[10](2017)在《新疆南疆绵羊的泰勒虫感染情况及种类鉴定》文中认为羊泰勒虫病是经媒介蜱传播的一种血液原虫病,该病主要可引起感染动物高热、体表淋巴结肿大、贫血和消瘦等症状,严重者可致死亡。该病呈地方流行性,尤其对我国西北地区养羊业危害较大。国内外有关羊血液内泰勒虫病的流行情况和检测方法研究较多,但对于新疆南疆地区绵羊的泰勒虫病感染情况和病原种类的报道尚较少。本研究旨在应用显微镜检查和PCR技术查明该区域绵羊血液中泰勒虫的感染情况,并鉴定其病原种类,以期为养羊业中羊泰勒虫病的诊断和防治提供科学依据。1.为了解喀什地区绵羊泰勒虫病的流行情况,于2015年11月至2016年1月,采用血涂片镜检法对喀什11个(区、县)258只当地成年绵羊的血液样品进行检查。结果发现泰勒虫阳性样品151份,泰勒虫总感染率为59.0%。不同采样点绵羊的泰勒虫感染率存在差异,其中莎车绵羊的泰勒虫感染率最高达75%,而喀什市绵羊的泰勒虫感染率较低,为8.3%。调查结果表明,喀什地区绵羊的泰勒虫病普遍流行,应加强对该病的综合防治。2.为进一步掌握新疆南疆绵羊的泰勒虫感染情况及其种类。基于泰勒虫通用引物,采用PCR法对该区域637份绵羊血液DNA样品进行检测,发现泰勒虫阳性样品400份,总感染率为62.8%。不同采样点绵羊的泰勒虫感染率存在差异,其中,莎车、英吉沙和泽普绵羊的泰勒虫感染率均高达100%,沙雅绵羊的泰勒虫感染率较低,为4.0%。分别用绵羊泰勒虫、尤氏泰勒虫和吕氏泰勒虫特异性引物对以上400份泰勒虫阳性样品进行扩增,结果显示,绵羊泰勒虫特异性引物扩增出399个阳性,而尤氏泰勒虫和吕氏泰勒虫均未扩增出。1份样品(样品编号为1443)在通用引物位点鉴定为阳性,但在3种特异性引物均未扩增出条带。3.随机选取PCR检测为绵羊泰勒虫的阳性样品中的56个样本和1443号样本进行测序,成功获得55个绵羊泰勒虫序列和1443号样本序列。在NCBI中进行Blast比对,应用Clustal X 2.11软件分别进行比对及序列拼接。发现所有绵羊泰勒虫序列均一致,与来自的伊朗的绵羊源绵羊泰勒虫(GenBank序列登录号为KX273858)、土耳其的绵羊源绵羊泰勒虫(KU342701)、中国的绵羊源绵羊泰勒虫(FJ603460)序列同源性为100%,鉴定为绵羊泰勒虫。1443号样本的序列与来自的伊朗的牛源环形泰勒虫(KX273857)、印度的牛源环形泰勒虫(KT736498)、中国的梅花鹿源环形泰勒虫(KT959231)序列同源性为100%,鉴定为环形泰勒虫。本研究应用显微镜检查和PCR技术对新疆南疆绵羊血液样品进行了泰勒虫检测,发现该区域绵羊的泰勒虫感染较为普遍,且发现了环形泰勒虫。本研究为绵羊的泰勒虫病的传播、诊断和防治提供了参考依据,并为绵羊泰勒虫病的免疫学研究提供有益资料。
二、甘南藏族自治州羊泰勒虫病流行病学调查(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、甘南藏族自治州羊泰勒虫病流行病学调查(论文提纲范文)
(1)吉林市左家镇羊泰勒虫感染情况调查(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 血液样品 |
1.2 主要试剂及仪器 |
1.3 血液涂片染色镜检 |
1.4 分子生物学检测 |
1.4.1 基因组DNA提取 |
1.4.2 羊泰勒虫PCR检测及测序 |
2 结果 |
2.1 血涂片染色镜检 |
2.2 羊泰勒虫PCR检测及测序 |
2.3 不同村羊泰勒虫感染率 |
3 结论 |
4 讨论 |
(2)新疆博州部分地方羊泰勒虫病流行病学调查(论文提纲范文)
1 试验材料 |
1.1 样本来源 |
1.2 DNA提取 |
1.3 绵羊泰勒虫的PCR扩增 |
1.4 羊泰勒虫18S rRNA 基因测序与序列分析 |
2 试验结果 |
2.1 羊泰勒虫病原PCR检测结果 |
2.2 不同地区羊泰勒虫病的检测结果 |
2.3 不同饲养方式羊泰勒虫病的检测结果 |
3 讨论与小结 |
(3)四川省攀西地区山羊泰勒虫病血清学检测(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.1.1 血清 |
1.1.2 主要试剂 |
1.2 方法 |
1.2.1 双抗原夹心ELISA法检测 |
1.2.2结果判定 |
1.2.3 数据分析 |
2 结果与分析 |
2.1 不同地区 |
2.2 不同季节 |
3 讨论 |
4 结论 |
(4)羊泰勒虫套式PCR检测方法的建立(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 样本的采集 |
1.2 血液涂片染色 |
1.3 基因组DNA的提取 |
1.4 引物设计与合成 |
1.5 PCR扩增 |
1.6 目的基因序列测定 |
1.7 特异性试验 |
1.8 敏感性试验 |
1.9 临床样本检测 |
2 结果 |
2.1 血涂片镜检 |
2.2 PCR扩增 |
2.3 目的基因序列测定 |
2.4 特异性试验 |
2.5 敏感性试验 |
2.6 临床样本检测 |
3 讨论 |
(5)羊泰勒虫吉林株的鉴定及系统进化分析(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 样本的采集 |
1.2 基因组DNA的提取 |
1.3 引物设计与合成 |
1.4 目的基因PCR扩增 |
1.5 目的基因序列测定及系统进化分析 |
1.6 MPSP基因生物信息学分析 |
2 结果 |
2.1 血涂片镜检结果 |
2.2 MPSP基因的PCR扩增与序列分析 |
2.3 遗传进化分析 |
2.4 MPSP基因生物信息学分析 |
3 讨论 |
(6)青海省硬蜱多样性及蜱传病原基因多态性研究(论文提纲范文)
摘要 abstract 第一章 引言 |
1.1 蜱分类概述 |
1.2 蜱传病原概述 |
1.2.1 无浆体 |
1.2.2 立克次体 |
1.2.3 伯氏疏螺旋体 |
1.2.4 梨形虫 |
1.2.5 Colpodella spp.病原 |
1.2.6 蜱传病原常用检测方法的研究进展 |
1.2.7 研究背景、目的与意义 第二章 青海地区的蜱种多样性的调查 |
2.1 材料 |
2.1.1 蜱虫样品 |
2.1.2 试剂 |
2.1.3 耗材 |
2.1.4 仪器设备 |
2.2 方法 |
2.2.1 采集地点的选择 |
2.2.2 蜱虫的采集 |
2.2.3 蜱虫的形态学鉴定 |
2.2.4 蜱虫的分子学鉴定 |
2.2.5 PCR阳性产物纯化与回收 |
2.2.6 目的基因片段的克隆与测序 |
2.2.7 序列和数据分析 |
2.3 实验结果 |
2.3.1 蜱虫采集结果 |
2.3.2 蜱虫形态鉴定结果 |
2.3.3 蜱种分子鉴定结果 |
2.4 讨论 第三章 青海地区的蜱种携带病原的检测 |
3.1 材料 |
3.1.1 DNA样品 |
3.1.2 实验标准菌株 |
3.1.3 试剂 |
3.1.4 仪器设备 |
3.2 方法 |
3.2.1 引物和探针的设计和合成 |
3.2.2 羊无浆体的检测 |
3.2.3 边缘无浆体的检测 |
3.2.4 牛无浆体、嗜吞噬细胞无浆体的检测 |
3.2.5 蜱传立克次体的检测 |
3.2.6 蜱传伯氏疏螺旋体的检测 |
3.2.7 蜱传梨形虫的检测 |
3.2.8 山羊无浆体的检测 |
3.2.9 Colpodella spp.病原的检测 |
3.2.10 PCR阳性产物纯化与回收 |
3.2.11 目的基因片段的克隆与测序 |
3.2.12 序列和数据分析 |
3.2.13 反向线状印迹杂交技术检测 |
3.3 结果 |
3.3.1 羊无浆体的检测 |
3.3.2 边缘无浆体的检测 |
3.3.3 牛无浆体的PCR检测 |
3.3.4 嗜吞噬细胞无浆体的检测 |
3.3.5 蜱传立克次体的检测 |
3.3.6 伯氏疏螺旋体的检测 |
3.3.7 梨形虫的检测结果 |
3.3.8 新发蜱传病原山羊无浆体的检测 |
3.3.9 新发蜱传病原Colpodella spp.的检测 |
3.4 讨论 |
3.4.1 无浆体 |
3.4.2 立克次体 |
3.4.3 伯氏疏螺旋体 |
3.4.4 梨形虫 |
3.4.5 新发蜱传病原 第四章 青海地区的蜱种携带病原的风险评估 |
4.1 材料 |
4.1.1 青海地区蜱种信息的数据 |
4.1.2 青海地区蜱种携带病原的数据 |
4.1.3 青海地区蜱种采集地点的数据 |
4.2 方法 |
4.3 结果 |
4.3.1 羊无浆体的风险评估分析 |
4.3.2 牛无浆体的风险评估分析 |
4.3.3 嗜吞噬细胞无浆体的风险评估分析 |
4.3.4 立克次体的风险评估分析 |
4.3.5 伯氏疏螺旋体的风险评估分析 |
4.3.6 梨形虫的风险评估分析 |
4.3.7 山羊无浆体的风险评估分析 |
4.3.8 Colpodella spp.病原的风险评估分析 |
4.4 讨论 第五章 羊无浆体MSP1a基因多态性分析 |
5.1 材料 |
5.1.1 蜱虫样品 |
5.1.2 羊基因组样品 |
5.1.3 菌株 |
5.2 方法 |
5.2.1 引物的设计和合成 |
5.2.2 全国羊样品羊无浆体的检测 |
5.2.3 蜱体内和全国羊基因组中羊无浆体MSP1a基因的扩增 |
5.2.4 羊无浆体MSP1a基因PCR阳性产物纯化与回收 |
5.2.5 羊无浆体MSP1a基因片段的克隆与测序 |
5.2.6 序列和数据分析 |
5.3 结果 |
5.3.1 蜱样品羊无浆体MSP1a基因多态性的分析 |
5.3.2 全国羊样品羊无浆体的检测结果 |
5.3.3 全国羊样品羊无浆体MSP1a基因多态性的分析 |
5.4 讨论 第六章 全文总结 附表 参考文献 致谢 作者简介 |
(7)基于rMPSP的牛泰勒虫病试纸条快速诊断方法的建立(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
英文缩略表 |
第一章 引言 |
1.1 病原学分类 |
1.2 生活史 |
1.3 流行区域 |
1.4 诊断方法 |
1.4.1 血涂片法 |
1.4.2 分子学诊断 |
1.4.2.1 聚合酶链式反应(PCR) |
1.4.2.2 重组酶聚合酶扩增技术(RPA) |
1.4.2.3 环介导等温扩增技术(LAMP) |
1.4.2.4 反向线性印记技术(RLB) |
1.4.2.5 实时荧光定量PCR(REAL-TIMEQPCR) |
1.4.3 血清学诊断 |
1.4.3.1 酶联免疫吸附试验(ELISA) |
1.4.3.2 补体结合试验 |
1.4.3.3 免疫胶体金快速层析技术 |
1.5 MPSP基因的研究进展 |
1.6 本研究的目的意义 |
第二章 中华泰勒虫MPSP基因的克隆表达及反应原性检测 |
2.1 材料 |
2.1.1 主要仪器 |
2.1.2 虫株与血清 |
2.1.3 主要试剂 |
2.2 方法 |
2.2.1 中华泰勒虫基因组的提取 |
2.2.2 引物的合成 |
2.2.3 MPSP基因的扩增 |
2.2.4 PGEM-T-EASY/MPSP重组质粒的构建 |
2.2.5 PET-28A/MPSP表达质粒的构建 |
2.2.6 重组蛋白的诱导表达 |
2.2.7 蛋白的纯化 |
2.2.8 蛋白的浓缩及浓度测定 |
2.2.9 反应原性分析 |
2.3 结果 |
2.3.1 MPSP基因的扩增 |
2.3.2 PET-28A-MPSP重组质粒的PCR及双酶切鉴定 |
2.3.3 PET-28A/MPSP蛋白的表达及纯化 |
2.3.4 蛋白的浓缩及浓度测定 |
2.3.5 重组MPSP蛋白反应原性的分析 |
2.4 讨论 |
第三章 MPSP蛋白多克隆抗体的制备及纯化鉴定 |
3.1 材料 |
3.1.1 主要仪器 |
3.1.2 主要试剂 |
3.1.3 抗原制备 |
3.1.4 实验动物 |
3.2 方法 |
3.2.1 抗体制备 |
3.2.1.1 实验动物准备 |
3.2.1.2 免疫前阴性血清采集 |
3.2.1.3 抗原乳化 |
3.2.1.4 抗原注射 |
3.2.1.5 免疫后血清 |
3.2.2 抗体的纯化 |
3.2.3 酶联免疫吸附试验测定MPSP抗体效价 |
3.3 结果 |
3.3.1 抗体的纯化 |
3.3.2 MPSP血清抗体效价的测定 |
3.4 讨论 |
第四章 牛泰勒虫病免疫胶体金检测试纸条的制备 |
4.1 材料和仪器 |
4.1.1 主要仪器 |
4.1.2 主要试剂及材料 |
4.1.3 血清与样品 |
4.2 方法 |
4.2.1 胶体金的制备 |
4.2.2 胶体金标记抗原最佳用量的确定 |
4.2.3 胶体金标记抗原最适PH的确定 |
4.2.4 金标抗原的制备 |
4.2.5 金标抗原工作浓度的确定 |
4.2.6 确定检测带及质控带的工作浓度 |
4.2.7 免疫胶体金试纸条的制备 |
4.2.8 免疫胶体金试纸条的应用及结果判定 |
4.2.8.1 待检样品处理 |
4.2.8.2 检测方法 |
4.2.8.3 结果判定 |
4.2.9 试纸条评价试验 |
4.2.9.1 特异性试验 |
4.2.9.2 敏感性试验 |
4.2.9.3 试纸条批内和批间重复性试验 |
4.2.9.4 试纸条检测性能的评价 |
4.3 结果 |
4.3.1 胶体金标记抗原最适用量及PH的确定 |
4.3.2 试纸条检测带及质控带抗原、抗体工作浓度的确定 |
4.3.3 特异性试验 |
4.3.4 敏感性试验 |
4.3.5 批内批间重复性试验 |
4.3.6 检测性能的评价 |
4.4 讨论 |
第五章 免疫胶体金试纸条在野外样品检测中的应用效果评价 |
5.1 材料 |
5.1.1 血清样品 |
5.1.2 抗原、试剂 |
5.1.3 基因组及对照血清 |
5.2 方法 |
5.2.1 免疫胶体金试纸条检测程序 |
5.2.2 间接ELISA方法检测程序 |
5.2.3 免疫胶体金试纸条与ELISA方法检测结果的比对 |
5.3 结果 |
5.3.1 免疫胶体金试纸条检测方法对野外样品的检测 |
5.3.2 RMPSP-ELISA方法对甘南地区野外样品的检测 |
5.3.3 免疫胶体金试纸条与RMPSP-ELISA检测方法结果的对比 |
5.4 讨论 |
第六章 全文结论 |
参考文献 |
致谢 |
作者简介 |
(8)甘南藏族自治州部分地区牦牛泰勒虫病的血清学调查(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 血清样品 |
1.2 菌株、载体与试剂 |
1.3 基因组与对照血清 |
1.4 抗原的制备 |
1.5 间接ELISA方法的检测程序 |
1.6 牦牛血清样品的间接ELISA检测及分析 |
2 结果 |
2.1 牦牛血清样品的间接ELISA检测 |
2.2 不同年龄段牦牛的泰勒虫病血清学检测结果的统计学分析 |
2.3 不同性别间牦牛泰勒虫病血清学检测结果的统计学分析 |
3 讨论 |
(9)吉林省部分地区羊泰勒虫病流行病学调查及分类鉴定(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 血液样本的采集 |
1.2 主要试剂 |
1.3 基因组DNA的提取 |
1.4 羊泰勒虫的PCR检测 |
1.5 序列比对与进化分析 |
2 结果 |
2.1 血液样本PCR检测 |
2.2 不同地区羊群感染羊泰勒虫病情况 |
2.3 不同品种羊群感染羊泰勒虫病情况 |
2.4 不同饲养方式羊群感染羊泰勒虫病情况 |
2.5 序列分析和系统发育树的建立 |
3 讨论 |
(10)新疆南疆绵羊的泰勒虫感染情况及种类鉴定(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
第一章 绪论 |
1.1 前言 |
1.2 分类和命名 |
1.2.1 分类 |
1.2.2 羊泰勒虫主要虫种 |
1.3 形态学 |
1.4 临床症状和致病性 |
1.5 病理变化 |
1.6 生活史 |
1.7 流行概况 |
1.8 诊断 |
1.9 防治 |
第二章 喀什地区绵羊泰勒虫病感染情况调查 |
2.1 前言 |
2.2 材料与方法 |
2.2.1 样品来源 |
2.2.2 检查方法 |
2.3 结果 |
2.3.1 病原检查 |
2.3.2 绵羊的泰勒虫感染情况 |
2.3.3 不同养殖条件下感染情况 |
2.4 讨论 |
2.4.1 不同地区羊泰勒虫感染情况存在差异 |
2.4.2 不同年龄段和不同品种羊泰勒虫感染情况不同 |
2.4.3 不同季节和饲养模式条件下羊泰勒虫感染情况存在差异 |
2.4.4 绵羊泰勒虫病的防治 |
2.5 小结 |
第三章 新疆南疆绵羊源泰勒虫虫种鉴定 |
3.1 前言 |
3.2 材料与方法 |
3.2.1 样品来源 |
3.2.2 主要仪器设备 |
3.2.3 全血DNA提取 |
3.2.4 PCR扩增 |
3.2.5 电泳 |
3.2.6 测序和比对 |
3.3 结果 |
3.3.1 绵羊血液DNA样品的PCR检测 |
3.3.2 新疆南疆绵羊的泰勒虫病流行情况 |
3.3.3 不同饲养方式羊泰勒虫病感染情况 |
3.3.4 泰勒虫属特异性引物的PCR检测 |
3.3.5 泰勒虫种特异性引物的PCR检测 |
3.3.6 绵羊源泰勒虫种类鉴定 |
3.4 讨论 |
3.4.1 我国寄生于绵羊的泰勒虫种类 |
3.4.2 绵羊的泰勒虫种类鉴定方法 |
3.4.3 不同地区绵羊感染泰勒虫种类存在差异 |
3.4.4 药物治疗和防控 |
3.5 小结 |
结论 |
参考文献 |
致谢 |
作者简介 |
四、甘南藏族自治州羊泰勒虫病流行病学调查(论文参考文献)
- [1]吉林市左家镇羊泰勒虫感染情况调查[J]. 徐雪雪,王春玲,马明阳,陈思锦,田万年. 贵州畜牧兽医, 2020(05)
- [2]新疆博州部分地方羊泰勒虫病流行病学调查[J]. 宁东坡,张杨,肖培培,李敏,樊新丽,巴音查汗. 云南畜牧兽医, 2020(04)
- [3]四川省攀西地区山羊泰勒虫病血清学检测[J]. 郝桂英,袁晓琴,陈永航,莫全,严光文,李凤琴,杨应东,万洁,文建国,吉色曲伍. 中国动物检疫, 2020(08)
- [4]羊泰勒虫套式PCR检测方法的建立[J]. 田万年,宋旗,孙凰员,郑秀红. 畜牧与兽医, 2020(07)
- [5]羊泰勒虫吉林株的鉴定及系统进化分析[J]. 田万年,徐雪雪,张佳娟. 畜牧与饲料科学, 2020(01)
- [6]青海省硬蜱多样性及蜱传病原基因多态性研究[D]. 韩蓉. 中国农业科学院, 2018(01)
- [7]基于rMPSP的牛泰勒虫病试纸条快速诊断方法的建立[D]. 陈银银. 中国农业科学院, 2018(12)
- [8]甘南藏族自治州部分地区牦牛泰勒虫病的血清学调查[J]. 陈银银,赵帅阳,关贵全,李有全,刘爱红,石红梅,殷宏,刘军龙,罗建勋. 中国兽医科学, 2018(06)
- [9]吉林省部分地区羊泰勒虫病流行病学调查及分类鉴定[J]. 田万年,薛书江,贾立军,张守发,李国江. 中国兽医杂志, 2017(10)
- [10]新疆南疆绵羊的泰勒虫感染情况及种类鉴定[D]. 王海国. 塔里木大学, 2017(07)