一、海福特牛精液品质及保存稀释液配方研究（论文文献综述）
赵家才,毛翔光,高玉琼,李雯,何永富,张洁[1]（2021）在《影响种公牛精液品质的因素》文中研究说明[目的]本文旨在分析种公牛精液品质的影响因素,以便进一步提高种公牛冷冻精液质量。[方法]对2010年至2020年采精记录种公牛的射精量、原精活力、精子密度、解冻活力进行统计分析。[结果]笔者对影响牛精液质量的主要因素进行了研究。结果发现,不同种之间、不同品种之间、不同品系之间、不同年龄、不同季节之间、不同饲养和管理方法之间,公牛的精液质量存在显着差异。[结论]遗传、气候环境、饲养管理等因素影响种公精液质量。
费俊阳,高庆华,肖国亮[2]（2018）在《绵羊鲜精超长时间保存技术研究》文中研究指明为了研究精液稀释液对绵羊鲜精超长时间保存效果的影响,试验选择萨福克和杜泊公羊精液分别在不同季节采用专用稀释液处理并在0℃冰水混合物状态下保存,检测不同时间的鲜精顶体完整性及精子活率,同时进行人工授精,统计受胎率。结果表明:萨福克公羊精子活率在115 d缓慢下降;而杜泊公羊精子活率在保存第6天和第15天有一个相对快速下降的过程;59 d内萨福克公羊精子活率变化较为平缓,精子活率均在0.70以上;03 d精子顶体完整性高于612 d,但差异不显着（P>0.05）;第15天精子顶体完整性显着低于012 d（P<0.05）。春季第9天和第12天保存的精子活率显着高于秋季（P<0.05）。利用012 d保存的精液人工授精后,绵羊受胎率可达到70%以上,保存15 d的精液受胎率显着下降（P<0.05）。说明专用稀释液能超长时间（12 d）保证精子活率,并且在春季保存效果优于秋季,受胎率得到保证。
吴大平[3]（2017）在《不同抗氧化剂对地中海水牛精液冷冻保存效果的影响研究》文中研究说明意大利地中海水牛因其高产奶量和优良的奶质被公认为是目前世界上河流型水牛中乳用性能最好的品种之一。广西于2014年引进该品种水牛,受冷冻保存配方、冷冻程序和个体差异等因素影响,目前的种公牛精液冷冻保存效果不甚理想,这极大地影响了地中海水牛的繁殖效率。因此,探讨抗氧化剂等对精液冷冻保存效果的影响,研发针对意大利地中海水牛的精液稀释液配方,对提高种公牛利用率有着重大意义。为此,本研究在传统精液稀释液基础上,首先重新比较有效成分、调整其比例、同时引入新的保护剂、拟出新配方,随后应用改进的配方探讨添加褪黑素、谷胱甘肽和维生素E等不同抗氧化剂对地中海水牛精液冷冻保存的效果影响。研究结果如下。1.地中海水牛精液冷冻稀释液配方的改进研究在水牛精液常用冷冻稀释液的基础上,首先对配方中的能量物质、抗冻物质和抗菌物质分别进行效果比较。结果发现,稀释液成分中卵黄的冷冻保存效果优于鲜全奶;3%甘油和2%乙二醇联合作用效果优于5%的甘油、5%的乙二醇和5%的DMSO三者单独作用时的效果;青霉素和庆大霉素的抑菌效果比较明显;其次,对于新引入的保护剂牛血清白蛋白（BSA）,和未添加组相比,0.9 mg/mL的BSA显着提高了水牛精子的活率,降低其畸形率（P<0.05）;改进后的地中海水牛精液稀释液配方为:0.10 g/mL葡萄糖、0.0006 g/mL柠檬酸钠、0.0011 g/mL青霉素、0.0006 g/mL庆大霉素、0.9 mg/mLBSA、3%甘油、2%乙二醇、20%卵黄、75%蒸馏水。2.褪黑素、谷胱甘肽和维生素E对地中海水牛精液冷冻保存效果的影响在冷冻稀释液中添加褪黑素（MLT）时发现,添加0.Img/mLMLT显着提高了受精卵分裂率和GSH-Px酶活性（P<0.05）,对精子活率、畸形率、运动性能等变化无显着差异（P>0.05）;添加0.2mg/mL、0.4mg/mL MLT明显提高了冻后精子活率、顶体完整率、GSH-Px酶活性、受精卵分裂率和囊胚率（P<0.05）,添加0.2mg/mLMLT还显着降低了精子畸形率（P<0.05）。添加0.8mg/mLMLT明显降低了精子活率（P<0.05）,对精子运动性能、受精卵分裂率、囊胚率等均没有显着影响（P>0.05）。添加谷胱甘肽（GSH）处理时发现,添加0.1mMGSH显着提高精子前向性和质膜完整率,降低了精子畸形率（P<0.05）,对精子活率和顶体完整率无明显影响（P>0.05）。添加0.2 mMGSH明显了提高精子活率、运动性能、质膜完整率、GSH-Px酶活性和囊胚率（P<0.05）,显着降低精子畸形率和MDA水平（P<0.05）。0.4mMGSH增加了精子畸形率,显着提高GSH-Px酶活性、受精率分裂率、囊胚孵化率（P<0.05）,对顶体完整率、SOD酶活性等无明显影响（P>0.05）。添加0.8 mMGSH增加了精子畸形率（P<0.05）,对精子抗氧化物酶活性和囊胚率等无显着性影响（P>0.05）。添加维生素E（VE）处理时发现,与未添加组相比,0.1 mg/mL和0.2 mg/mLVE对精子活率无明显影响（P>0.05）。0.2mg/mL、0.4mg/mLVE明显提高精子的GSH-Px酶活性、顶体完整率、质膜完整率、受精卵分裂率、囊胚率和囊胚孵化率,显着降低了精子MDA水平（P<0.05）。0.4mg/mL、0.8mg/mLVE显着提高了精子活率（P<0.05）,其中0.4mg/mL时精子活率最大,0.4mg/mL VE显着降低了精子畸形率,0.8mg/mLVE导致畸形率增加（P<0.05）,0.8mg/mLVE明显提高受精卵分裂率（P<0.05）,对囊胚率和囊胚孵化率无显着影响（P>0.05）。3.三种抗氧化剂配伍作用对地中海水牛精液冷冻保存效果的影响为了解两种或多种抗氧化剂配伍添加的协同效果,根据单独添加MLT、GSH和VE时的作用效果确定各抗氧化剂的配伍浓度,分别为MLT（0.2 mg/mL、0.4 mg/mL）、GSH（0.1 mM、0.2 mM）、VE（0.2 mg/mL、0.4 mg/mL）,将其两两组合,共形成12个配伍组合。结果发现,与未添加组相比,0.2 mg/mL VE+O.1 mM GSH、0.4 mg/mL VE+0.2 mg/mL MLT、0.2 mg/mL MLT+0.1 mM GSH组合均能在一定程度上提高了精子活率,降低精子畸形率,其中 0.2 mg/mL MLT+0.1 mM GSH 和 0.4 mg/mL VE+0.2 mg/mL MLT 表现较突出。三个配伍组合均显着提高了精子运动性能、顶体完整率和质膜完整率（P<0.05）,其中尤以0.2mg/mLMLT+0.ImMGSH组合提升效果最好。三个配伍组合均显着提高了受精卵分裂率（P<0.05）,0.4 mg/mL VE+0.2 mg/mL MLT和 0.2 mg/mL MLT+0.1 mM GSH组合对囊胚率的提高有显着差异（P<0.05）,0.4 mg/mL VE+0.2 mg/mL MLT和0.2 mg/mL VE+0.1 mM GSH显着提高了囊胚孵化率（P<0.05）。综合考虑,0.2 mg/mL MLT+0.1 mM GSH 和 0.4 mg/mL VE+0.2 mg/mL MLT 组合优于 0.2 mg/mL VE+0.1 mM GSH。以上结果表明,添加 0.2 mg/mL MLT、0.2 mM GSH 或 0.04 mg/mL VE可提高水牛精液的冷冻保存效果较好,采用0.4mg/mLVE+0.2mg/mL MLT或0.2 mg/mL MLT+0.1 mM GSH的组合添加剂对地中海水牛精液冷冻保存可取得较好效果。
王维[4]（2015）在《奶山羊扩繁技术、XY精子分选及Y染色体ZNF280BY基因拷贝数变异研究》文中研究表明随着我国集约化与规模化的奶山羊产业发展,高效扩繁技术应用与推广越来越受到广大养殖户的重视,如同期发情技术、精液保存技术可快速提高种群质量并便于统一管理。优秀种公羊具有显着的遗传改良作用,充分发挥种公羊的繁殖潜力有利于扩大良种覆盖率及提高奶山羊整体生产水平。本研究以西农萨能奶山羊为试验对象,通过同期发情试验方案筛选,种公羊精液常温及冷冻保存方法,奶山羊X、Y精子分选技术参数,性控精液低剂量输精试验以及Y染色体ZNF280BY基因拷贝数变异等奶山羊关键繁殖技术的系统研究,为建立高效奶山羊繁育技术提供了重要的理论与试验依据。获得了以下主要结果:1.非繁殖季节奶山羊同期发情试验研究发现,处理2组（CIDR+300 IU PMSG+5μg LHRH-A3）与处理3组（CIDR+450 IU PMSG+5μg LHRH-A3）中奶山羊发情率高于处理1组（CIDR+150 IU PMSG+5μg LHRH-A3）（P<0.05）,但各组处理母羊受胎率及产羔率均无差异（P>0.05）。繁殖季节奶山羊同期发情试验研究发现,羊表现发情后10h促黄体激素（LH）达到峰值;处理?组（CIDR+300 IU PMSG）与处理П组（CIDR+300 IU PMSG+5μg LHRH-A3）母羊受胎率、产羔率均高于处理Ш组（CIDR+300 IU PMSG+40 IU FSH+5μg LHRH-A3）（P<0.05）,同时发现1胎次和2胎次母羊的受胎率均高于3胎次母羊（P<0.05）。2.研究季节对西农萨能羊种公羊精液品质的影响,结果表明在春季、夏季及秋季种公羊精液的活率、体积、密度、单次射精总精子数以及质膜完整率均高于冬季（P<0.05）,夏季与秋季种公羊精子的顶体完整率高于春季与冬季（P<0.05）。将各季节采集的鲜精进行冷冻精液制作,解冻后检测精液品质发现,夏季与秋季种公羊精液活率、质膜完整率与顶体完整率均高于春季和冬季（P<0.01）。3.通过两种精液冷冻稀释液（Tris Citric acid Glucose buffer,TCG与Glucose Milk buffer,GM）对种公羊精液冷冻保存的研究发现,西农萨能奶山羊分离精浆不利于精液的冷冻保存（P<0.05）。利用TCG制作的冷冻精液解冻后精子顶体完整率高于GM组（P<0.05）。利用TCG与GM制备的冷冻精液用于人工授精,结果表明TCG处理组的母羊受胎率（45.9±2.06%）及产羔率（159.6±3.25）均高于GM组（33.3±3.15%与150±4.34%）（P<0.05）。4.利用常温保存稀释液（TRISM与TRISA）保存种公羊鲜精12h后发现,两种稀释液在19℃的保存效果均优于4℃和15℃（P<0.05）。TRISM与TRISA分别保存种公羊精液,在19℃条件下经过长途运输（10h）送到分选中心进行X、Y精子分选。通过分选系统关键步骤（染色液浓度与激光强度）的筛选获得精液染色液Hoechst33342的最佳浓度为28μM/m L,精子分选的紫外激光强度为6 W。TRISM与TRISA保存的精液分别进行X、Y精子分选,结果表明在Hoechst33342染色前及染色后精子活率均无差异（P>0.05）,而分选后、降温后TRISM组精子活率高于TRISA组（P<0.01）;分选后的性控精液用TCG进行冷冻保存,解冻后TRISA组的精子活率为40.3±2.3%,低于TRISM组的精子活率（58.7±3.3%）（P<0.01）。检测TRISM制备的性控精液,结果表明Y精子纯度为95.3±2.2%,X精子纯度为95.2±1.8%,差异不显着（P>0.05）,X精子与Y精子质膜完整率及顶体完整率均无差异（P>0.05）。5.性控精液腹腔镜低剂量输精试验发现,输精剂量分别为2.2×106与4.4×106个有效精子分别获得25%与50%受胎率、100%与187.5%的产羔率,100%与93.3%的后代性别符合率。性控精液常规人工输精（4.4×106个有效精子）获得8.3%受胎率、100%产羔率与100%后代性别符合率。性控后代的出生重、断奶重与非性控后代无差异（P>0.05）。6.种公羊Y染色体ZNF280BY基因拷贝数分析,结果发现ZNF280BY特异存在于Y染色为多拷贝基因,且在6个山羊品种中均表现为拷贝数变异且非正态分布。其中美姑山羊的拷贝数中值最低（19个）,关中奶山羊的拷贝数中值最高151个,西农萨能奶山羊的拷贝数中值为113个。西农萨能奶山羊、关中奶山羊、崂山奶山羊、文登奶山羊与云南圭山羊品种间拷贝数无差异（P>0.05）,美姑山羊与其他山羊品种都存在差异（P<0.05）。ZNF280BY基因可作为一种分子标记用于种公羊相关繁殖力的筛选。本研究表明,试验所采用的同期发情方案可提高母羊的发情率、受胎率及产羔率;春季、夏季及秋季种公羊精液品质良好,TCG制备的冷冻精液可提高母羊的受胎率及产羔率;获得奶山羊X、Y精子流式分选技术参数,TRISM常温保存种公羊精液效果较好,能高效分离X、Y精子,性控精液低剂量输精可获得预期的性别后代;同时发现ZNF280BY在山羊个体与品种间存在拷贝数变异。
王丽云,刘玉,朱子岳,张海涛[5]（2014）在《牛冷冻精液稀释液的研究进展》文中进行了进一步梳理精液的冷冻保存技术是随着人工授精（AI）的广泛应用而发展起来的,为了长时间地保存精液并能够扩大精液的量,在鲜精中加入一定的稀释液,目的是为了使精子有一个适于存活的环境,保证细胞膜的完整不被损害,要求能供给养分、耐低温、抗冻、维持渗透压和电解平衡、维持pH值、抑制细菌生长。精液冷冻保存始于Spallanzani用雪冷却精子的试验〔1〕,解冻后发现有极少数精子仍然存活。
郑卫民,李梅,郭子记,陈辉,杨海涛,武致存,高璞[6]（2014）在《稀释液中影响冷冻精液质量的主要因素》文中研究指明随着现代科学技术的发展,人工授精技术（AI）已被广泛应用于动物繁殖的生产实践当中,可以加快遗传选择,有效提高雄性的种用价值和利用率。精液冷冻技术是人工授精技术的重大变革,不但解决了精液长期保存的问题,还使精液不受时间、地域和国别的限制,进一步提高和扩大了优良种质资源的利用率,获得更大的遗传进展。精液冷冻技术和人工授精技术的有机结合可以减少种畜饲养成本,
周明,彭建国[7]（2013）在《昆明犬精液品质分析》文中指出随着养犬业的发展,犬繁殖性能在养犬业中占有极其重要的地位。在生产实践中,一些外貌被评定为优秀的种犬却因为犬的精液质量差、受精能力低等因素而被淘汰,即使与排卵正常的母犬交配,母犬不受精或受精卵数远远低于排卵数。并且公犬精液的质量与遗传有密切关系,这样交配产生的后代也可能具有繁殖力低的遗传特征,形成恶性循环[1]。因此,在
李晓霞[8]（2011）在《减少水牛XY精子分离过程中损伤的相关研究》文中认为我国分离水牛XY精子的研究始于2002年,并已建立了一整套分离精子的技术体系,于2006年2月研究成功世界首例分离精子性别控制的试管水牛双犊。然而,精子在分离过程中经历了染色、高倍稀释、激光照射、高压、离心和冷冻解冻等因素的作用,其活力及在体内、外的受精能力受到影响。本研究是为了减少水牛精子在分离、冷冻过程中的细胞器损伤,提高分离精子的质量和体外受精生产胚胎的效率,从而在节约成本的同时获得最大的经济效益,为实现奶水牛产业化推广提供有力保障。研究分为四部分,其方法和结果如下：研究一,对水牛精子在分离、冷冻过程中的运动特性、线粒体活性、质膜完整性及凋亡等精液品质相关参数进行系统分析,以了解水牛精子在分离、冷冻过程中不同阶段（新鲜、染色后、分选后和冷冻-解冻后）对精子细胞器损伤的程度,以便优化水牛精子分离程序。研究结果发现：（1）不同品种及个体的水牛精子在分离过程中不同阶段（新鲜、染色后、分离后和冷冻-解冻后）的精子运动参数变化的结果表明,分离、冷冻程序对水牛精子活力的相关参数（MOT, PMOT, VSL, VCL, VAP, BCF, LIN）均有明显影响（p<0.05）；其中冷冻-解冻后的分离精子活力的相关参数（MOT, PMOT, VSL, VCL, VAP, BCF, LIN）数值均显着降低（p<0.05）,说明冷冻-解冻程序对分离精子的损伤最严重,影响了精子的运动特性。另外,品种和个体对水牛精子分离、冷冻中活力的影响程度亦不同（p<0.05）。（2）利用荧光显微镜检测水牛精子分离、冷冻过程对精子质量的影响,发现NL566水牛新鲜精子线粒体高膜电位百分率（83.50%Vs65.10%,59.38%）、质膜完整率（75.90%vs69.00%,58.66%）显着高于染色后和冷冻-解冻后的精子（p<0.05）,而与分选后精子无显着差异（p>0.05）；NL566水牛新鲜精子经染色、分选和冷冻-解冻后凋亡率明显升高（8.56%vs13.99%,14.60%,22.73%）。结果表明,在水牛精子分离、冷冻过程中,染色和冷冻-解冻会造成精子线粒体和膜损伤。NL3619和ML1005水牛精子分离冷冻过程对精子质量的影响,也得到了与NL566类似的结果。流式细胞仪检测结果与荧光显微镜一致。（3）荧光显微镜法和流式细胞仪法检测分离精子的线粒体活性（71.38%vs73.67%）、质膜完整性（69.25%vs69.49%）和凋亡率（15.05%vs19.51%）均无差异,表明这两种方法均能有效评估精子质量。（4）精子的线粒体活性、质膜完整性和凋亡间均具有相关性。研究二,利用激光光镊拉曼光谱分析水牛精子分离、冷冻过程中蛋白质、碳水化合物和脂类等大分子物质结构和含量的变化,探讨水牛分离精子的损伤机理,以便进一步优化分离、冷冻精子程序。研究结果发现：（1）随着水牛精子分离、冷冻程序的进行,对精子头部的拉曼光谱分析可知,精子细胞内的葡萄糖（926cm-1）和蛋白质（1129、1612、1633cm-1）含量明显提高,而脂类（1301、1661cm-1）含量明显降低；精子中段部的拉曼光谱分析可知,脂类（1299、1445、1654cm-1）含量明显降低,而糖原（936cm-1）和蛋白质（1125cm-1）含量明显提高,这可能与精子细胞器的损伤有关。且四个阶段精子细胞的拉曼指纹图谱相似,仅峰值不同,从图形上无法有效识别这四个阶段的精子细胞。经优化的PCA-DFA预测新鲜、染色后、分选后和冷冻-解冻后精子的灵敏度和特异性基本>90%。（2）分离、冷冻过程中同一阶段,不同品种或同一品种不同个体的水牛精子的拉曼光谱检测结果发现,ML1005与NL566、NL3619相比,在染色后、分选后阶段精子的各物质含量略有不同,而在新鲜和冷冻-解冻后精子的各物质含量有明显变化,说明各个阶段对不同个体的水牛精子损伤程度也会有所差异。且三头水牛精子细胞的拉曼指纹图谱相似,仅峰值不同,从图形上无法有效识别这三头牛的精子细胞。经优化的PCA-DFA预测NL566、NL3619和ML1005精子的特异性均>95%。研究三,添加抗氧化剂在水牛精子分离、冷冻程序的染色液、分离收集液和冷冻稀释液中,以提高分离精子的质量。研究结果发现：（1）不同抗氧化剂27℃孵育1h、24h、48h、72h后,MLT组精子线粒体高膜电位百分率均显着升高（p<0.05）,而PCB和IGF-I组仅在孵育72h后,精子线粒体高膜电位百分率显着升高（p<0.05）,说明MLT、 PCB、IGF-I均具有一定的抗氧化作用。（2）分别添加MLT、PCB和IGF-I在水牛精子分离、冷冻过程中的染色液、分离收集液和冷冻稀释液中,与对照组相比,均能在不影响质膜完整性和细胞凋亡的同时,显着提高冷冻-解冻后分离精子的线粒体活性（p<0.05）。（3）分别添加MLT、PCB和IGF-I在水牛精子分离、冷冻过程中的染色液、分离收集液和冷冻稀释液中,检测染色后、分选后和冷冻-解冻后精子的拉曼光谱。结果表明,在冷冻稀释液分别添加MLT、PCB和IGF-I,冷冻-解冻后的分离精子的拉曼光谱除归属糖原（头部490cm-1；中段部936cm-1）和脂类（头部1300、1661cm-1；中段部1300、1445、1655cm-1）特征峰外,其它特征峰强度明显减弱；而在染色液、分离收集液分别添加NLT、PCB和IGF-I对染色后和分选后精子的拉曼光谱的特征峰变化不明显。另外,在水牛精子分离、冷冻过程各稀释液中添加抗氧化剂组与对照组的精子细胞的拉曼指纹图谱相似,仅峰值不同,从图形上无法有效识别这两组精子细胞。经优化的PCA-DFA预测添加抗氧化剂组精子的灵敏度和特异性均>90%。研究四,将添加MLT、PCB和IGF-I的分离精子应用于体外胚胎生产技术系统,以提高水牛分离精子生产性控胚胎的效率。结果发现：（1）水牛卵母细胞在添加有10%ECS+FSH（0.5μg/ml）+LH（5μg/ml）+E2（1μg/ml）+EGF（10ng/ml）的成熟液基础上再添加50μM Cysteamine+0.3mM Cystine体外成熟培养24h后,进行体外受精,其囊胚率显着高于对照组（30.9%vs17.2%）（p<0.05）。（2）上游法和精子洗涤法处理水牛分离精子体外受精后,二者的囊胚率分别为14.17%和19.33%,差异显着（p<0.05）,说明采用精子洗涤法处理分离精子更有利于提高分离精子体外受精胚胎发育的效率。（3）添加MLT、PCB和IGF-I的分离精子分别进行IVF,囊胚率分别为27.21%、24.39%和21.62%,与对照组18.24%的囊胚率均有一定程度提高,且添加MLT和PCB分离精子的囊胚率与对照组差异显着（p<0.05）。其中添加MLT的分离精子效果最好,其体外受精的囊胚率与未分离冻精无显着差异（27.21%vs28.3%）（p>0.05）。说明通过优化分离程序中的染色液、分离收集液和冷冻稀释液可以提高分离精子体外受精的发育能力,并且能达到未分离精子体外胚胎生产效率。
蔡虹[9]（2009）在《牛精液冷冻稀释液新配方研究》文中研究指明本研究所用精液采自西门塔尔、夏洛莱、利木赞和安格斯各3头种公牛,通过改变牛精液冷冻保存液组成成分,检测了不同种公牛冷冻前后精子活力、顶体完整率及精子畸形率,从而了解不同个体和品种对精液冷冻效果的影响,并筛选出牛精液冷冻稀释液新配方,以提高牛精液冷冻保存的效果,提高人工授精受胎率。试验及主要结果如下:1、为了分析用大豆卵磷脂替代卵黄的精液冷冻保存效果,并筛选大豆卵磷脂最适浓度,分二个试验。①在牛冷冻精液稀释液国家标准推荐的配方基础上,添加1%、3%、5%、7%、9%的大豆卵磷脂替代卵黄。结果发现:当卵磷脂浓度为3%时,精液解冻后精子活率（为42.11±3.62%）显着高于对照组（冻后活力为38.334±2.45%,p＜0.05）。卵磷脂浓度为5%时,解冻后活力为41.004±3.77%,仍高于对照组（p＞0.05）。冻后各组精子顶体完整率和畸形率差异较小（p＞0.05）。②以Tris-柠檬酸缓冲液为稀释液,添加1%、3%、5%、7%、9%的大豆卵磷脂替代卵黄,结果发现:当卵磷脂浓度为3%时,精液解冻后精子活力（39.56±3.40%）高于对照组（35.89±2.32%,p＞0.05）,而各组精子顶体完整率和畸形率没有显着差异（p＞0.05）。因此,牛冷冻稀释液中添加3%和5%的卵磷脂冷冻效果较好。2、为了比较甘油（G）、乙二醇（EG）和二甲基酰胺（DA）三种抗冻保护剂两两配合的冷冻保护效果,分别设置了1%、3%、5%三个浓度两两正交组合,结果发现:5%G+3%EG、5%G+3%DA、3%EG+3%DA几个试验组效果较好,冻后活力分别为40.334±2.52%、38.674±1.15%、39.004±1.00%,均高于各自的对照组（p＞0.05）。其中5%G+3%EG解冻后活力最高,精子顶体完整率也较高,畸形精子较少。3、为了比较甘油（G）、乙二醇（EG）和二甲基酰胺（DA）三种抗冻保护剂联合应用的冷冻保护效果,分别设置了1%、3%、5%三个浓度进行正交组合,结果发现:1%G+3%EG+3%DA组合冷冻效果最好（冻后活力达40.004±2.65%）,高于对照组（p＞0.05）。但解冻后顶体完整率在各试验组间,试验组和对照组间差异均不显着（p＞0.05）。4、为了分析牛个体和品种对精子冷冻解冻的影响,分别取西门塔尔（XM）、利木赞（LM）和夏洛莱牛（XL）的精液进行冷冻,并检测了精子冷冻前后活力、冷冻后顶体完整率和精子畸形率。结果:XM、LM和XL鲜精活力无明显差异（p＞0.05）。但是冷冻解冻后,XL精液冻后活力显着低于XM和LM（p＜0.05）,顶体完整率和畸形率差异不显着（p＞0.05）。
郭德[10]（2008）在《西门塔尔冻精液改良甘南牦牛试验研究》文中提出本试验引进两个类型西门塔尔牛的冷冻精液,用人工授精方法对40头甘南牦牛进行改良试验,测定两试验组和对照组牦牛的受胎率,试验组犏牛犊和对照组牦牛犊各月龄生长指标。试验结果如下:1受胎率结果试验Ⅰ组牛人工授精群受胎率为66.79 %,比当地对照群高18.58 %,试验Ⅱ组牛人工授精群受胎率为67.34 %,比当地对照群高19.13 %,对照组群受胎率仅48.21%。2犊牛体重指标上的差异三组牛犊在初生时体重差异不显着,试验Ⅰ组牛和试验Ⅱ组牛在生长趋势一致,从初生到6月龄生长速度很快,6月龄时试验Ⅰ组牛体重为92.94±1.29 kg/头,试验Ⅱ组牛体重为78.08±1.31 kg/头, 6月龄以后到10月龄,生长速度较为缓慢,10月龄到14月龄,生长速度又加快,之后又缓慢增长,进入18月龄后又进入下一个快速生长期,18月龄时试验Ⅰ组牛体重为162.60±2.07 kg/头,试验Ⅱ组牛体重为151.34±1.10 kg/头,两组差异不显着;对照组牦牛在9月龄之前快速生长,生长速度要快于试验组,之后缓慢增长,10月龄左右达到第一个峰值,10月龄时体重为112.93±6.37 kg/头,之后呈负增长状态,到15月龄后恢复正增长状态。3犊牛体尺指标上的差异试验Ⅰ组犏牛在初生时体斜长为54.23±2.13 cm,18月龄体斜长为130.42±2.54 cm;试验Ⅱ组犏牛在初生时体斜长为52.16±1.62 cm,在18月龄体斜长为124.35±2.63 cm,两组之间差异不显着（p>0.05）;对照牦牛在初生时体斜长为48.11±1.16 cm,在18月龄体斜长为109.50±2.18 cm,从试验开始到结束,试验组与对照组之间在体斜长上差异显着（p<0.05）。试验Ⅰ组犏牛在初生时胸围为60.34±2.76 cm,18月龄胸围为135.47±2.37 cm;试验Ⅱ组犏牛在初生时胸围为58.67±3.15 cm,18月龄胸围为131.49±2.66 cm;对照牦牛在初生时胸围为50.78±2.05 cm,18月龄胸围131.18±2.10 cm。从试验开始到结束,试验组之间在胸围上差异不显着（p>0.05）,试验组与对照组之间在胸围上差异显着（p<0.05）。试验Ⅰ组犏牛在初生时体高为59.11±2.1 2 cm,在18月龄体高为134.29±2.86 cm;试验Ⅱ组犏牛在初生时体高为57.17±2.18cm,在18月龄体高为131.71±2.44 cm;对照牦牛在初生时体高为50.78±1.12 cm,在18月龄体高为104.08±2.14 cm。从试验开始到结束,试验组之间在体高上差异不显着（p>0.05）,试验组与对照组之间在体高上差异极显着（p<0.01）。三组牛管围的增加主要集中在8月龄之前,后期增加不大,并从初生到18月龄在管围变化差异上不显着（p>0.05）。综合考虑,本试验认为在甘肃省甘南州阿孜试验站用人工授精方法改良的甘南牦牛,从受胎率和犊牛生长指标上看,以西门塔尔52号公牛为佳。
二、海福特牛精液品质及保存稀释液配方研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、海福特牛精液品质及保存稀释液配方研究（论文提纲范文）
（1）影响种公牛精液品质的因素（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 种公牛的来源 |
| 1.2 饲养管理 |
| 1.3 塑料大棚的建设 |
| 1.4 TMR技术 |
| 1.5 精液品质的检测 |
| 1.6 冷冻精液的制作 |
| 1.7 数据来源和处理方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 种公牛精液品质分析 |
| 2.2 不同季节公牛精液品质变化分析 |
| 2.3 TMR技术应用前后种公牛精液品质变化分析 |
| 2.4 塑料大棚改造公牛运动场前后种公牛精液品质变化分析 |
| 3 讨论与小结 |
| 3.1 遗传 |
| 3.2 气候环境 |
| 3.3 饲养管理 |
| 3.3.1 TMR技术可用于种公牛饲养 |
| 3.3.2 塑料大棚改造种公牛运动场切实可行 |
（2）绵羊鲜精超长时间保存技术研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 精液采集及检测 |
| 1.2 不同保存时间精子活率的测定 |
| 1.3 不同保存时间精子顶体完整性的测定 |
| 1.4 不同保存时间精子受胎率的测定 |
| 1.5 数据的统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同品种绵羊鲜精超长时间保存活率比较 |
| 2.2 绵羊鲜精超长时间保存顶体完整性比较 |
| 2.3 不同季节绵羊鲜精超长时间保存精子活率比较 |
| 2.4 不同保存时间精子受胎率的测定 |
| 3 讨论 |
| 3.1 绵羊鲜精低温保存技术 |
| 3.2 精子活率与顶体完整率 |
| 3.3 季节对精液低温保存的影响 |
| 3.4 鲜精保存的应用 |
| 4 结论 |
（3）不同抗氧化剂对地中海水牛精液冷冻保存效果的影响研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 文献综述 |
| 1 地中海水牛研究现状 |
| 2 水牛精液冷冻保存研究概况 |
| 2.1 精液的冷冻保存原理 |
| 2.2 精液的冷冻损伤机理 |
| 2.3 精液稀释液中的添加剂 |
| 3 褪黑素、谷胱甘肽和维生素E的研究进展 |
| 3.1 褪黑素的研究进展 |
| 3.2 谷胱甘肽的研究进展 |
| 3.3 维生素E的研究进展 |
| 4 研究目的和意义 |
| 第二部分 试验研究 |
| 第一章 地中海水牛精液冷冻稀释液配方的改进研究 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.3 试验设计 |
| 1.4 数据处理 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 试验水牛的筛选 |
| 2.2 E61水牛精液冷冻前的基本情况 |
| 2.3 不同抗生素对水牛精液的抑菌效果比较 |
| 2.4 不同稀释液成分对水牛精液品质的影响 |
| 2.5 不同浓度BSA对水牛精液品质的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二章 褪黑素、谷胱甘肽和维生素E对地中海水牛精液冷冻保存效果的影响研究 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.3 试验设计 |
| 1.4 数据处理 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 水牛精液冷冻前的基本情况 |
| 2.2 褪黑素对水牛精子冻后活率、运动性能和顶体完整率等的影响 |
| 2.3 不同浓度褪黑素对冷冻解冻后水牛精子抗氧化物酶活性的影响 |
| 2.4 不同浓度褪黑素对解冻后水牛精子体外受精的分裂率和囊胚率的影响 |
| 2.5 谷胱甘肽对水牛精子冻后活率、运动性能和顶体完整率等的影响 |
| 2.6 不同浓度谷胱甘肽对冷冻解冻后水牛精子抗氧化物酶活性的影响 |
| 2.7 不同浓度谷胱甘肽对解冻后水牛精子体外受精的分裂率和囊胚率的影响 |
| 2.8 维生素E对水牛精子冻后活率、运动性能和顶体完整率等的影响 |
| 2.9 不同浓度维生素E对冷冻解冻后水牛精子抗氧化物酶活性的影响 |
| 2.10 不同浓度维生素E对解冻后水牛精子体外受精的分裂率和囊胚率的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 三种抗氧化剂配伍作用对地中海水牛精液冷冻保存效果的影响研究 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.3 试验设计 |
| 1.4 数据处理 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 E13水牛精液冷冻前的基本情况 |
| 2.2 抗氧化剂组合对水牛精子活率、畸形率的影响 |
| 2.3 抗氧化剂组合对水牛精子冻后运动性能、顶体完整率和质膜完整率的影响 |
| 2.4 不同抗氧化剂组合对水牛精子冻后体外受精的分裂率和囊胚率的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
（4）奶山羊扩繁技术、XY精子分选及Y染色体ZNF280BY基因拷贝数变异研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 山羊同期发情及人工授精技术的研究与应用 |
| 1.2.1 山羊同期发情技术 |
| 1.2.2 山羊人工授精技术 |
| 1.3 山羊精液保存技术研究进展 |
| 1.3.1 山羊精液液态保存技术 |
| 1.3.2 山羊精液冷冻保存技术 |
| 1.4 性别控制技术研究与应用 |
| 1.4.1 精子流式细胞分选仪 |
| 1.4.2 哺乳动物X、Y精子流式分选的研究进展 |
| 1.5 Y染色体基因功能的研究 |
| 1.5.1 Y染色体功能 |
| 1.5.2 Y染色体基因拷贝数的研究 |
| 1.5.3 检测Y染色体基因拷贝数的技术 |
| 1.5.4 反刍动物雄性繁殖力 |
| 1.6 本研究的目的与意义 |
| 第二章 奶山羊非繁殖季节与繁殖季节同期发情试验研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验地点及试验动物 |
| 2.1.2 主要试剂及仪器设备 |
| 2.1.3 同期发情处理方法 |
| 2.1.4 激素检测 |
| 2.1.5 精液采集与人工授精 |
| 2.1.6 试验设计 |
| 2.1.7 数据分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 不同处理对非繁殖季节同期发情效果的影响 |
| 2.2.2 不同处理对非繁殖季节母羊受胎率及产羔率的影响 |
| 2.2.3 繁殖季节不同处理对发情期母羊血液中LH含量的影响 |
| 2.2.4 不同处理对繁殖季节同期发情效果的影响 |
| 2.2.5 繁殖季节不同处理及胎次对受胎率及产羔率的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 不同处理对非繁殖季节奶山羊发情效果的影响 |
| 2.3.2 不同处理对非繁殖季节奶山羊受胎率及产羔率的影响 |
| 2.3.3 同期发情处理对发情羊血液中LH含量的影响 |
| 2.3.4 不同处理对繁殖季节奶山羊繁殖性能的影响 |
| 2.3.5 PMSG对奶山羊受胎率及产羔率的影响 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 季节对种公羊精液品质的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验地点及试验动物 |
| 3.1.2 主要试剂和仪器 |
| 3.1.3 鲜精的采集与质量评定 |
| 3.1.4 精液冷冻保保存及解冻检测 |
| 3.1.5 试验设计 |
| 3.1.6 数据分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 种公羊鲜精精液品质检测结果 |
| 3.2.2 精液冷冻过程对种公羊个体的影响 |
| 3.2.3 种公羊精液冷冻解冻后检测结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 季节对种公羊精液样品采集数量的影响 |
| 3.3.2 季节对种公羊精液品质的影响 |
| 3.3.3 种公羊精液品质分析的指标 |
| 3.3.4 精液冷冻过程中对种公羊个体差异的影响 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 稀释液对种公羊精液冷冻保存效果的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验地点及试验动物 |
| 4.1.2 主要试剂及仪器设备 |
| 4.1.3 精液冷冻保存稀释液的配制 |
| 4.1.4 鲜精的采集与质量评定 |
| 4.1.5 精液的冷冻及解冻后检测 |
| 4.1.6 同期发情及冷冻精液人工授精 |
| 4.1.7 试验设计 |
| 4.1.8 数据分析 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 种公羊精液品质检测结果 |
| 4.2.2 不同精液冷冻方案对冷冻效果的影响 |
| 4.2.3 冷冻精液人工授精对母羊受胎率及产羔率的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 精液品质检测方法 |
| 4.3.2 不同冷冻精液处理方案对精液品质的影响 |
| 4.3.3 冷冻精液人工授精对母羊受胎率及产羔率的影响 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 奶山羊X、Y精子流式分选技术体系研究 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 试验地点及试验动物 |
| 5.1.2 主要试剂及仪器设备 |
| 5.1.3 精液液态保存稀释液的配制 |
| 5.1.4 鲜精的采集与质量评定 |
| 5.1.5 奶山羊X、Y精子流式分选 |
| 5.1.6 试验设计 |
| 5.1.7 数据分析 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 不同温度及稀释液对种公羊精液液态保存的影响 |
| 5.2.2 奶山羊X、Y精子流式分选 |
| 5.2.4 两种稀释液对奶山羊X、Y精子流式分选的效果分析 |
| 5.2.5 奶山羊性控精液解冻后精液品质分析 |
| 5.3 讨论 |
| 5.3.1 液态保存对精子活率的影响 |
| 5.3.2 奶山羊X、Y精子流式分选 |
| 5.4 本章小结 |
| 第六章 奶山羊性控精液低剂量输精研究 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 试验地点及试验动物 |
| 6.1.2 主要试剂及仪器设备 |
| 6.1.3 试验设计 |
| 6.1.4 数据分析 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 奶山羊性控精液低剂量输精 |
| 6.2.2 奶山羊性控精液低剂量输精结果 |
| 6.2.3 奶山羊性控后代评估 |
| 6.3 讨论 |
| 6.3.1 奶山羊性控精液低剂量输精 |
| 6.3.2 奶山羊性控后代评估 |
| 6.4 本章小结 |
| 第七章ZNF280BY基因在不同山羊品种间的拷贝数变异 |
| 7.1 材料与方法 |
| 7.1.1 试验地点及试验动物 |
| 7.1.2 主要试剂及仪器设备 |
| 7.1.3 种公羊血液样本的DNA提取与质量检测 |
| 7.1.4 引物设计 |
| 7.1.5 实时定量PCR |
| 7.1.6 ZNF280BY基因拷贝数的计算 |
| 7.1.7 数据分析 |
| 7.2 结果与分析 |
| 7.2.1 奶山羊ZNF280BY CDS克隆 |
| 7.2.2 ZNF280BY与DDX3Y引物雄性特异性检测 |
| 7.2.3 ZNF280BY与DDX3Y引物扩增标准曲线的绘制 |
| 7.2.4 不同山羊品种ZNF280BY的拷贝数 |
| 7.2.5 不同山羊品种ZNF280BY的拷贝数箱线图 |
| 7.3 讨论 |
| 7.3.1 ZNF280BY在山羊Y染色体上的分析 |
| 7.3.2 ZNF280BY的拷贝数研究 |
| 7.4 本章小结 |
| 结论 |
| 本研究的创新点 |
| 下一步研究计划 |
| 参考文献 |
| 缩略词 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（5）牛冷冻精液稀释液的研究进展（论文提纲范文）
| 1 常规卵黄稀释液的改良 |
| 1.1 缓冲剂 |
| 1.2 非电解质或弱电解质 |
| 1.3 抗冻保护剂 |
| 1.4 抗生素 |
| 1.5 抗氧化剂 |
| 1.6 其它添加成分 |
| 2 无卵黄稀释液的研究 |
| 2.1 动物源性无卵黄稀释液的研究 |
| 2.2 无动物源性稀释液的研究 |
（6）稀释液中影响冷冻精液质量的主要因素（论文提纲范文）
| 1 营养物质 |
| 2 缓冲物质 |
| 3 卵黄 |
| 4 冷冻保护剂 |
| 5 抗氧化物质 |
| 6 抗生素 |
（8）减少水牛XY精子分离过程中损伤的相关研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1 流式细胞仪分离哺乳动物XY精子的研究概况和基本流程 |
| 1.1 哺乳动物分离精子的研究概况 |
| 1.2 流式细胞仪分离哺乳动物XY精子的基本流程 |
| 2 哺乳动物XY分离精子产业化存在的问题 |
| 2.1 分离、冷冻程序对精子质量的影响 |
| 2.2 分离精子性别控制技术成本高 |
| 3 哺乳动物XY分离精子技术体系的优化 |
| 3.1 哺乳动物XY分离精子稀释液的优化 |
| 3.2 哺乳动物XY分离精子技术与其它繁殖技术相结合应用于生产 |
| 4 哺乳动物XY分离精子损伤检测技术手段及研究现状 |
| 4.1 荧光显微镜和流式细胞仪的应用 |
| 4.2 拉曼光谱在生物学中的应用 |
| 第二章 水牛精子分离、冷冻对精子细胞器损伤程度的影响 |
| 前言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 主要试剂药品 |
| 1.2 试验动物 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 1.4 材料获取 |
| 1.5 精子的准备 |
| 1.6 试验设计 |
| 1.7 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 运动特性的分析 |
| 2.2 不同品种、不同个体的水牛精子分离冷冻过程中精子线粒体活性(HMMP)的检测 |
| 2.3 不同品种、不同个体的水牛精子分离冷冻过程中精子凋亡的检测 |
| 2.4 不同品种、不同个体的水牛精子分离冷冻过程中精子质膜完整性的检测 |
| 2.5 精子线粒体膜电位、质膜完整性和凋亡的不同检测方法的比较 |
| 2.6 水牛精子线粒体膜电位、质膜完整性和凋亡的相关性分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 不同品种、不同个体的水牛精子分离冷冻对精子活力相关参数的影响 |
| 3.2 分离过程对不同品种、个体的水牛精子质量的影响 |
| 3.3 精子线粒体膜电位、质膜完整性和凋亡的不同检测方法比较 |
| 4 小结 |
| 第三章 拉曼光谱在水牛分离精子损伤检测体系中的应用 |
| 前言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 主要试剂药品 |
| 1.2 试验动物 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 1.4 材料获取 |
| 1.5 精子的准备 |
| 1.6 细胞拉曼光谱数据的收集 |
| 1.7 原始数据处理及多元分析 |
| 1.8 试验设计 |
| 1.9 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 利用激光光镊拉曼光谱仪检测分离、冷冻过程对水牛精子质量的影响 |
| 2.2 利用激光光镊拉曼光谱仪检测在分离、冷冻过程中不同个体水牛精子的损伤情况 |
| 3 讨论 |
| 3.1 拉曼光谱分析分离、冷冻过程对水牛精子质量的影响 |
| 3.2 拉曼光谱分析分离、冷冻过程中同一阶段对不同水牛精子质量的影响 |
| 3.3 多元统计分析 |
| 4 小结 |
| 第四章 水牛精子分离、冷冻过程中添加不同物质对精子质量的影响 |
| 前言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 主要试剂药品 |
| 1.2 试验动物 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 1.4 材料获取 |
| 1.5 精子的准备 |
| 1.6 细胞拉曼光谱数据的收集 |
| 1.7 原始数据处理及多元分析 |
| 1.8 试验设计 |
| 1.9 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 MLT、PCB、IGF-I孵育不同时间对精子线粒体活性的影响 |
| 2.2 褪黑素(MLT)在水牛精子分离、冷冻中的抗氧化作用 |
| 2.3 联合添加丙酮酸钠、过氧化氢酶和牛血清白蛋白(PCB)在水牛精子分离、冷冻过程的各稀释液对精子的保护作用 |
| 2.4 添加胰岛素样生长因子I(IGF-I)在水牛精子分离、冷冻过程的各稀释液对精子质量的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 褪黑素(MLT)在水牛精子分离、冷冻中的抗氧化作用 |
| 3.2 联合添加丙酮酸钠、过氧化氢酶和牛血清白蛋白(PCB)在水牛精子分离、冷冻过程的各稀释液对精子的保护作用 |
| 3.3 添加胰岛素样生长因子I(IGF-I)在水牛精子分离、冷冻过程的各稀释液对精子质量的影响 |
| 4 小结 |
| 第五章 分离、冷冻各稀释液中添加不同抗氧化剂对水牛分离精子体外胚胎发育的影响 |
| 前言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 主要试剂药品 |
| 1.2 试验动物 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 1.4 分离冻精材料获取 |
| 1.5 发情牛血清的制备 |
| 1.6 卵泡液的制备 |
| 1.7 卵母细胞收集和体外成熟 |
| 1.8 体外受精 |
| 1.9 体外培养 |
| 1.10 试验设计 |
| 1.11 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 成熟液中不同添加物对水牛卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响 |
| 2.2 上游法和精子洗涤法处理水牛分离精子对其体外受精胚胎发育的影响 |
| 2.3 水牛分离和未分离精子体外受精后胚胎发育的比较 |
| 2.4 水牛分离精液中添加不同抗氧化剂对分离精子体外受精的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 成熟液中不同添加物对水牛卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响 |
| 3.2 上游法和精子洗涤法处理水牛分离精子的体外受精比较 |
| 3.3 水牛分离和未分离精子体外受精比较 |
| 3.4 水牛分离精液中添加不同抗氧化剂对分离精子体外受精的影响 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 附表1 拉曼特征峰物质归属表 |
| 附表2 重要术语中英文对照 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
（9）牛精液冷冻稀释液新配方研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 牛精液冷冻保存技术研究进展 |
| 1 引言 |
| 2 国内外牛冷冻精液生产现状与发展趋势 |
| 2.1 国内外牛冷冻精液生产现状 |
| 2.1.1 冷冻方法 |
| 2.1.2 冷冻-解冻后精子活力 |
| 2.1.3 冷冻精液人工授精的受胎率 |
| 2.2 国内外牛冷冻精液发展趋势 |
| 3 精液稀释液成分研究进展 |
| 3.1 营养物质 |
| 3.2 缓冲物质 |
| 3.3 维持渗透压物质 |
| 3.4 防冷休克保护剂 |
| 3.5 抗冻保护剂 |
| 3.6 抗氧化物质 |
| 3.7 抗菌物质 |
| 3.8 其他添加物质 |
| 4 精液冷冻保存方法的研究进展 |
| 4.1 精液冷冻保存的冷源 |
| 4.2 冷冻程序 |
| 4.3 分装 |
| 5 冷冻过程中精子细胞的损伤变化 |
| 5.1 精液的成分变化 |
| 5.2 不同冷冻速度对精子的损伤 |
| 5.3 细胞膜损伤造成的精子损伤 |
| 5.4 精子形态的变化 |
| 5.5 精子细胞内成分的变化 |
| 6 影响精子冻后存活的因素 |
| 6.1 种属差异 |
| 6.2 冷冻精子的基因 |
| 6.3 冷冻前精子的质量 |
| 6.4 渗透性冷冻保护剂 |
| 6.5 精液稀释液 |
| 6.6 细胞内的Ca~(2+) |
| 6.7 活性氧ROS |
| 7 牛精液冷冻保存效果评定方法研究进展 |
| 7.1 评定指标和方法 |
| 7.1.1 外观检查法 |
| 7.1.2 精子活动能力评定 |
| 7.1.3 精子密度评定 |
| 7.1.4 精子畸形率和顶体完整率评定 |
| 7.1.5 精子存活时间和生存指数 |
| 7.1.6 精子细胞膜完整性的评价 |
| 7.1.7 精液中酶的活性 |
| 7.1.8 受精能力的检测 |
| 7.2 精液品质评定的新方法和新设备 |
| 7.2.1 精液品质分析仪 |
| 7.2.2 流式细胞计数仪分析精子染色体结构 |
| 7.2.3 流式细胞计数仪分析精子质膜变化 |
| 7.2.4 荧光极化各向异性测定精子质膜流动性 |
| 第二部分 试验研究 |
| 1 目的和意义 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 主要仪器和设备 |
| 2.1.3 主要药品及试剂 |
| 2.1.4 溶液配制 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 精液采集 |
| 2.2.2 鲜精品质的评定 |
| 2.2.3 精液的稀释 |
| 2.2.4 平衡与分装 |
| 2.2.5 精液冷冻 |
| 2.2.6 冷冻精液的解冻 |
| 2.2.7 精液品质检查指标及方法 |
| 2.2.8 统计分析 |
| 2.3 试验设计 |
| 2.3.1 测定不同个体和品种牛的精液品质 |
| 2.3.2 采用大豆卵磷脂替代卵黄 |
| 2.3.3 甘油、乙二醇和二甲基酰胺混合试验 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 外观检查结果 |
| 3.2 pH检查 |
| 3.3 不同个体和品种牛的鲜精及解冻后精液品质的差异 |
| 3.4 卵磷脂替代卵黄 |
| 3.4.1 国标稀释液基础上卵磷脂替代卵黄 |
| 3.4.2 Tris-柠檬酸稀释液基础上卵磷脂替代卵黄 |
| 3.5 三种抗冻保护剂的不同组合替代纯甘油 |
| 3.5.1 甘油(G)和乙二醇(EG)组合 |
| 3.5.2 甘油(G)和二甲基酰胺(DA)组合 |
| 3.5.3 乙二醇(EG)和二甲基酰胺(DA)组合 |
| 3.5.4 G、EG、DA组合 |
| 4 讨论 |
| 4.1 精液的颜色和pH |
| 4.2 大豆卵磷脂替代卵黄的效果 |
| 4.3 甘油、乙二醇和二甲基酰胺混合替代纯甘油冷冻的效果 |
| 4.3.1 甘油、乙二醇和二甲基酰胺两两组合的冷冻效果 |
| 4.3.2 甘油、乙二醇和二甲基酰胺三者组合的冷冻效果 |
| 4.4 牛的品种及个体差异和精液品质的关系 |
| 4.5 精液冷冻保存的几个技术问题 |
| 4.5.1 稀释液pH |
| 4.5.2 稀释方法、温度 |
| 4.5.3 精液冷冻的平衡时间 |
| 4.6 稀释基础液中各种物质的选择 |
| 4.6.1 缓冲液的选择 |
| 4.6.2 糖类的选择 |
| 4.6.3 蒸馏水的使用 |
| 4.7 稀释液优化组合 |
| 5 小结 |
| 5.1 本研究获得的结果 |
| 5.2 本研究的创新点 |
| 5.3 本研究的不足之处 |
| 5.4 下一步值得研究的工作 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）西门塔尔冻精液改良甘南牦牛试验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 引言 |
| 1 西门塔尔牛的品种品种特性 |
| 2 牦牛与普通牛种间杂交 |
| 2.1 种间杂交历史回顾 |
| 2.2 牦牛杂交改良 |
| 3 冷冻精液在牦牛改良上的应用研究 |
| 3.1 精液冷冻保存技术的发展简史 |
| 3.2 牦牛冷冻精液发展现状与应用前景 |
| 3.3 牦牛的人工授精技术的发展 |
| 4 冷冻精液的贮存 |
| 5 冷冻精液的解冻 |
| 5.1 解冻方法 |
| 5.2 解冻温度 |
| 5.3 解冻液 |
| 5.4 冻精解冻后的保存 |
| 6 影响牛冷冻精液受胎率的主要技术因素 |
| 6.1 精液的质量 |
| 6.2 熟练掌握人工授精技术 |
| 7 试验研究的背景 |
| 8 研究目的和意义 |
| 8.1 牦牛杂交改良的目的 |
| 8.2 研究意义 |
| 第二章 甘南牦牛的人工授精试验 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验地点及参配母牛 |
| 2.2 冷冻精液的准备和精子活力的鉴定 |
| 2.3 母牛的发情鉴定 |
| 2.4 冷冻精液的解冻与输精 |
| 3 结果 |
| 3.1 细管冻精各项指标测定 |
| 3.2 母牛发情临床表现 |
| 3.3 细管冻精配种后的受胎效果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 精子活率的评定 |
| 4.2 母牛发情临床表现 |
| 4.3 细管冻精配种后的受胎效果 |
| 5 结论 |
| 第三章 改良后西犏牛的生长性能分析 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验地点、试验期及试验牛 |
| 2.2 饲养管理 |
| 2.3 生长性能分析 |
| 2.4 数据处理和分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 试验牛体重变化 |
| 3.2 三组试验牛体尺变化 |
| 3.3 三组试验牛的越冬及健康状况 |
| 4 讨论 |
| 4.1 牦牛体重的变化规律 |
| 4.2 牦牛体尺的变化规律 |
| 4.3 犊牛的越冬及健康状况 |
| 5 结论 |
| 第四章 存在的问题与研究设想 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 导师简介 |
四、海福特牛精液品质及保存稀释液配方研究（论文参考文献）
- [1]影响种公牛精液品质的因素[J]. 赵家才,毛翔光,高玉琼,李雯,何永富,张洁. 中国牛业科学, 2021(03)
- [2]绵羊鲜精超长时间保存技术研究[J]. 费俊阳,高庆华,肖国亮. 黑龙江畜牧兽医, 2018(14)
- [3]不同抗氧化剂对地中海水牛精液冷冻保存效果的影响研究[D]. 吴大平. 广西大学, 2017(01)
- [4]奶山羊扩繁技术、XY精子分选及Y染色体ZNF280BY基因拷贝数变异研究[D]. 王维. 西北农林科技大学, 2015(01)
- [5]牛冷冻精液稀释液的研究进展[J]. 王丽云,刘玉,朱子岳,张海涛. 上海畜牧兽医通讯, 2014(06)
- [6]稀释液中影响冷冻精液质量的主要因素[J]. 郑卫民,李梅,郭子记,陈辉,杨海涛,武致存,高璞. 畜牧兽医杂志, 2014(01)
- [7]昆明犬精液品质分析[J]. 周明,彭建国. 黑龙江畜牧兽医, 2013(03)
- [8]减少水牛XY精子分离过程中损伤的相关研究[D]. 李晓霞. 广西大学, 2011(01)
- [9]牛精液冷冻稀释液新配方研究[D]. 蔡虹. 华中农业大学, 2009(S1)
- [10]西门塔尔冻精液改良甘南牦牛试验研究[D]. 郭德. 甘肃农业大学, 2008(08)